1、全自動生化分析儀有那些模塊組成 ?
光學系統(tǒng):老式的ACA系統(tǒng)采用鹵鎢燈、透鏡、濾色片、光電池組件。
新式ACA系統(tǒng)光學部分有很大的改進,ACA的分光系統(tǒng)因其光位置不同有前分光和后分光之分,先進的光學組件在光源與比色杯之間使用了一組透鏡,將原始光源燈投射出的光通過比色杯將光束變成光速(這與傳統(tǒng)的契型光束不同),這樣,即使比色杯再小,點光束也能通過。與傳統(tǒng)方法相比,能節(jié)約試劑消耗40-60%。
點光束通過比色杯后,在經(jīng)這一組還原透鏡(廣差糾正系統(tǒng)),將點光束還原成原始光束,在經(jīng)光柵分成固定的若干種波長(約10種以上波長)。
采用光/數(shù)碼信號直接轉(zhuǎn)換技術(shù)即將光路中的光信號直接變成數(shù)碼信號。將電磁波對信號的干擾及信號傳遞過程中的衰減完全消除。
同時,在信號傳輸過程中采用光導纖維,使信號達到無衰減,測試精度提高近100倍。光路系統(tǒng)的封閉組合,又使得光路無需任何保養(yǎng),且分光準確、壽命長。
恒溫系統(tǒng):由于生物化學反應(yīng)時溫度對反應(yīng)結(jié)果影響很大,故恒溫系統(tǒng)的靈敏度、準確度直接影響測量結(jié)果。
早期的生化儀器采用空氣浴的方法,后來發(fā)展到集干式空氣浴與水浴優(yōu)點于一身的恒溫液循環(huán)間接加溫干式浴。
其原理是在比色杯周圍設(shè)計一恒溫槽,在槽內(nèi)加入一種無味、無污染、不蒸發(fā)、不變質(zhì)的穩(wěn)定恒溫液,恒溫液的容量大,熱穩(wěn)定性好、均勻。在比色杯不直接接觸恒溫液,克服了水浴式恒溫易受污染和空氣浴不均勻、不穩(wěn)定的特點。
樣品反應(yīng)攪拌技術(shù)和探針技術(shù):傳統(tǒng)的反應(yīng)攪拌技術(shù)采用磁珠式和渦旋攪拌式兩種。
現(xiàn)在流行的攪拌技術(shù)是模仿手工清洗過程的多組攪拌棒組成的攪拌單元,當?shù)谝唤M攪拌棒在攪拌樣品/試劑或混合溶液時,第二組攪拌棒同時進行高速高效的清洗,第三組攪拌棒也同時進行溫水清洗和風干過程。
在單個攪拌棒的設(shè)計上,采用新型螺旋型高速旋轉(zhuǎn)攪拌,旋轉(zhuǎn)方向與螺旋方向相反,從而增加了攪拌的力度,被攪拌液不起泡,減少微泡對光的散射。
試劑及樣品探針依照早期電容式傳感的原理,但略加改進,增加了血凝塊和蛋白質(zhì)凝塊的報警,依照報警級別的重測結(jié)果,減少吸樣誤差,提高測試結(jié)果的可靠性。
大型生化儀器每小時檢測數(shù)多在1000個以上,因此自動重測相當重要,測試結(jié)果的主觀評價和手工重測已不能滿足臨床的需要。
其他方面:試劑、樣品的條形碼識別和計算機登錄,早期生化儀器由于缺乏條碼識別功能,出現(xiàn)錯誤機會較多。近幾年無論進口、國產(chǎn)生化儀器均采用條碼檢測,這項技術(shù)在生化儀器上的使用給高速ACA的研制提供了技術(shù)支持,也使得儀器相當支持。軟件的開發(fā)簡單易行,因此,條碼檢測是儀器智能化的基礎(chǔ)。開放式試劑,作為醫(yī)院選擇機型的一項重要因素,儀器是否支持開放式試劑非常重要。試劑開放后,醫(yī)院、科研單位可自主選擇試劑供應(yīng)商,在衡量價格、低度器結(jié)果的可靠性、試劑有效期等方面有了較大的自由度。離子選擇電極分析附件(ISE)、人體血清和尿液電解質(zhì)指標相當重要,ACA系統(tǒng)附帶ISE后,醫(yī)院可節(jié)省費用。
2、全自動生化分析儀原理有那些?
全自動生化分析儀就是將原始手工操作過程中的取樣、混勻、溫浴(37℃)檢測、結(jié)果計算、判斷、顯示和打印結(jié)果及清洗等步驟全部或者部分自動運行。
如今,生化檢驗基本上都實現(xiàn)了自動化分析,還有專為大型或超大型臨床實驗室和商業(yè)實驗室設(shè)計的全自動生化分析系統(tǒng),可根據(jù)實驗室的檢測量任意配置。
無論是當今運行速度最快(9800Test/h)的模塊式全自生化分析儀,還是原始手工操作用于比色的光電比色計,其原理都是運用了光譜技術(shù)中吸收光譜法。是生化儀最基本核心。
雙波長檢測原理的作用:
1. 消除噪音干擾。
2. 減少雜散光影響。
3. 減少樣品本身光吸收的干擾:當樣品中存在非化學反應(yīng)的干擾物如甘油三酯、血紅蛋白、膽紅素等時,會產(chǎn)生非特異性的光吸收,雙波長方式可以部分消除這類光吸收干擾。
3、其他方面問題。
為什么干擾物主波長和次波長越臨近越好?
雙波長設(shè)置的情況是,干擾物的光一般會出現(xiàn)光散射和非特異性光吸收,就需要設(shè)置主波長和副波長,主波長就是待測物質(zhì)特征吸收峰處。副波長設(shè)置的原則是干擾物在主波長的吸收與副波長吸光率越接近越好,如己糖激酶法測血糖,340nm作為主波長,380nm為副波長,血清蛋白在340nm和380nm處具有幾乎同等的吸收峰,因此能消除血紅蛋白的干擾。所以干擾物主波長和次波長越臨近越好。
測定要求
1. 樣品:血清、尿液、腦脊液等。
2. 試劑:單試劑、雙試劑
3. 雙波長:由主波長和副波長構(gòu)成的兩個波長。可以消除在檢測過程中的干擾。
4. 校準品(標準):比對未知樣品的濃度
5. 質(zhì)控品:用于生化儀在日常工作中對儀器、試劑等方面狀態(tài)的監(jiān)控。
方法
1. 終點法(endessay)完全被轉(zhuǎn)化成產(chǎn)物,不再進行反應(yīng)達到終點,取反應(yīng)終點的吸光度來計算被測物質(zhì)的濃度。生化檢驗中除酶和BUN、CRE外幾乎都用終點法來進行檢測。
1)一點終點法:取反應(yīng)達終點時的一個點的吸光度來計算結(jié)果。
2)二點終點法:取反應(yīng)尚未開始時讀取一個點的吸光度,待反應(yīng)達終點時再取第二點的吸光度。用第二點吸光度減去第一點吸光度的差值來計算結(jié)果。主要用于扣除試劑和樣品空白。保證結(jié)果的準確性。一般雙試劑用。
2. 固定時間法(兩點法):是取尚在反應(yīng)中的兩點間的差值來計算結(jié)果。此兩點既不是反應(yīng)起始點也不是終點。主要用于檢測一些非特異性的項目,如肌酐。
3. 連續(xù)監(jiān)測法(動力學法、速率法):是在測定酶的活性或酶代謝產(chǎn)物時,連續(xù)取反應(yīng)曲線中呈線性變化吸光度值(△;A/min)來計算結(jié)果。因在反應(yīng)線性時間內(nèi)各點間的吸光度差值為零故又稱謂零級反應(yīng)。
試劑問題
混成單一:比如酶法肌酐試劑,第一步R1中的酶要消除樣品中內(nèi)源性肌酸的干擾,如果混成單一試劑,則會使檢測結(jié)果偏高,消除法HDL、LDL也不能混成單一試劑,因為它們都要分別清除HDL和LDL以外的脂蛋白,從而達到檢測的目的,如果混成單一試劑,則會使測定的HDL和LDL不準確。
另外,有的試劑混成單一試劑后,穩(wěn)定性和抗干擾能力也會明顯下降。
解決辦法:
①在儀器通道或試劑位允許的情況下盡量使用雙試劑;
②如一定要使用單一試劑,最好選擇試劑廠家針對部份項目專門生產(chǎn)好的單一試劑。
開瓶:隨著全自動生化分析儀的普及,“開瓶穩(wěn)定性”也隨之受到了大家的重視,但是就目前有的試劑方法學來講,還達不到人們所要求的試劑開瓶后在儀器內(nèi)放很長時間不需要定標,比如ALP、TP、GSP等PH為堿性的試劑,開瓶后試劑會吸收空氣中的二氧化碳,使試劑本身的PH值下降。
如果長時間開瓶不定標或校準,會使檢測結(jié)果發(fā)生偏離,在國外有的項目有明文規(guī)定,必須72小時之內(nèi)定標,比如BUN。
但是在國內(nèi)的某些實驗室為了方便,很長時間都不作校準,導致測定結(jié)果的不準確。解決辦法:了解試劑的特性,及時對部份項目進行校準,對于每天標本量不多的醫(yī)院,可按1~2天的用量取用試劑放入儀器。
相混:將不同批號的試劑混合在一起使用的現(xiàn)象在檢驗中經(jīng)常發(fā)生,當然這一方面是為了節(jié)省成本,另一方面為了方便。
但是不管是什么品牌、什么試劑,由于不同批號的試劑生產(chǎn)時間不同,試劑中工具酶的活性會有差異,會發(fā)生水解的底物濃度隨時間長短也會不同。因此混在一起使用而又不定標,可能會導致檢測結(jié)果的不準確。還有如果有的試劑開瓶時間太長,空氣中的灰塵或細菌會進入瓶中,由于有的試劑含有大量的蛋白質(zhì)和鹽,是細菌生長的最好條件,雖然有的試劑添加了防腐劑,但防腐劑的防腐也是有一定限度的,而且絕大多數(shù)廠家的試劑中是沒有加防霉劑的。
解決辦法:
① 不同批號試劑建議不要混用,如果混用最好重新定標;
②試劑瓶在儀器內(nèi)使用時間不要過長,及時更換;
③一般每個試劑瓶內(nèi)由于試劑針不能吸完,或多或少都會留有幾毫升的試劑,如果是同一批號可以將未開瓶的同一批號試劑往里倒。但如果不是同一批號的試劑時倒人后最好定標,最好的做法是將每個批號的剩余試劑留起來待一定數(shù)量后混在一起,然后重新定標后檢測。
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